隔离| 样品材料 | 50ml EDTA 全血 |
| 隔离方法 | 非磁性，适用于CD19 S-pluliBeads® 抗人抗体，规格300微升 |
| 产率 | 约3.5 × 10⁶ 个 B 淋巴细胞 |
| 生存力 | 大于99% (台盼蓝染色法) |
| 纯度测定 | 抗CD20 FITC抗体染色后行流式细胞术分析 |
| 纯度 | 约97% B淋巴细胞 |
分析
抗原特异性记忆b细胞的频率测定。
靶活化后，通过ELISpot测定抗体分泌浆细胞 (ASC) 的丰度。
用多克隆活化混合物刺激分离的b细胞5天。然后使它们在用特异性抗原包被的平板上生长。孵育24小时后，进行测定。
用专用软件 (AID elispot6.0ispot) 对斑点进行计数和评价。在相邻的图中，蓝色数字表示每孔的抗原特异性点的数量。
facs分析b细胞分离
图1: 分离和刺激的B淋巴细胞的纯度
elispot分析
图2: 一式两份的抗Ig特异性细胞的ELISpot分析d1d2: 每个250个细胞/孔，d3d4: 每个500个细胞/孔，d5d6: 未活化的细胞 (每个500个细胞/孔)
elispot分析
图3: d7d8: 抗流感核衣壳特异性记忆b细胞，d9d10: nti破伤风类毒素特异性记忆b细胞，d11d12: 阴性对照。
评价/总结
S-pluriBead®CD19能够从人全血样品中分离出纯度为〜97% 的B淋巴细胞。
分离的靶标在锥虫蓝染色后显示> 99% 的活力。它们在细胞培养物中成功生长，并分化为分泌抗体的浆细胞 (asc)。发现asc适用于通过ELISpot测定分析抗原特异性记忆b细胞应答。结果与使用参考方法获得的结果相当 (Dynabeads®CD19 Pan B)。
有关参考方法，请参见出版物: Bussmann BM，Reiche S，Bieniek B，Krznaric I，Ackermann F，Jassoy C: HIV特异性记忆b细胞的丧失是针对HIV的体液免疫应答功能障碍的潜在机制。病毒学2010; 397(1):7-13。)
